L’application des techniques dites rapides de la biologie moléculaire à l’étude d’avortements spontanés

Abstract

L’Avortement Spontané (AS), encore appelé Fausse-Couche Spontanée (FCS), désigne la perte du conceptus avant sa viabilité, c'est-à-dire avant 20 semaines de gestation ou pesant moins de 500g. Le rôle du facteur génétique dans les FCS est indéniable. En effet, les anomalies chromosomiques, principalement numériques, sont responsables de plus de 50% des FCS. Le caryotype standard était jusqu’à présent la méthode de référence pour l’étude cytogénétique des produits de FCS. Cependant, il est souvent impossible à établir en raison des échecs de culture, liés principalement à la macération des échantillons. Les techniques de Biologie Moléculaire offrent une alternative au caryotype, avec des performances qui ne cessent d’évoluer, et des approches révolutionnaires dans l’analyse cytogénétique des FCS afin de surmonter les limites du caryotype. Notre travail consistait en la description et l’évaluation de la performance d’une nouvelle technique prometteuse dite « rapide » de Biologie Moléculaire : « Prenatal BoBsTM », en comparaison avec d’autres techniques existantes sur le plan pratique actuel : FISH interphasique, MLPA et le caryotype conventionnel, dans le but de déterminer sa fiabilité et sa robustesse dans des conditions cliniques en routine, ainsi que dans l’identification des anomalies chromosomiques qui peuvent être à l’origine des pertes foetales. Dans ce sens, nous avons réalisé une analyse cytogénétique de 240 produits de FCS prélevés sur des patientes âgées entre 19 et 43 ans, avec des âges de gestations allant de la 5ème à la 41ème semaine d’aménorrhée. Cette étude s’est déroulée entre janvier 2011 et décembre 2014. Sur les 71 échantillons analysés par Prenatal BoBsTM, nous avons diagnostiqué une trisomie 21 et une déletion del 17p13.3 qui étaient passées inaperçues lors de l’analyse caryotypique. Les résultats étaient concluants dans 49 cas pour lesquels le caryotype n’a pu être réalisé en raison de l’échec des cultures cellulaires. Sur les 66 cas analysés par FISH, deux trisomies 21, une monosomie X, une trisomie 18 et deux triploïdies ont été identifiées. Les 53 cas analysé par la MLPA montraient une trisomie 21, une monosomie X et une microdélétion [XY, del 22 (q11.21)] . Prenatal BoBsTM a enregistré un taux de détection de ~ 90%, plus élevé que les autres techniques utilisées, ces dernières ayant montré un taux d’échec élevé qui se situait entre 28 et 45% ». Toutes ces approches ont un positionnement différent en terme de richesse d’informations fournies et de délais de rendu des résultats. Cependant, Prenatal BoBs™ semble être rapide, fiable, facilement applicable en routine, et constitue une bonne alternative à d’autres techniques existantes, particulièrement le caryotype dans l’analyse cytogénétique des FCS, notamment lorsque le tissu est trop macéré pour réaliser une culture cellulaire. C’est une technique prometteuse qui peut être très utile dans les régions du monde où le personnel et les laboratoires de cytogénétique sont limités.